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间接免疫荧光助力新型肺炎研究
发布时间: 129 天前|542 次浏览

上海首株新型冠状病毒肺炎病理毒株分离成功

(间接免疫荧光显示病毒感染的细胞呈现合胞体 来源/复旦大学)

由上海市疾病预防控制中心挑选多例确认病例的鼻/咽拭子样本用于实验,复旦大学上海医学院基础医学院新型冠状病毒攻关团队通过使用两种细胞系(vero-E6和Huh7细胞)接种样本,从一例病例样本中,已成功分离并鉴定出新型冠状病毒(2019-nCoV)毒株,该毒株在细胞培养中扩增迅速,可得到较高滴度的病毒;间接免疫荧光法发现病毒感染细胞显示典型冠状病毒样病变-合胞体。目前,实验室已基本完成该病毒株的全基因组序列测定和分析,与新型冠状病毒(2019-nCov)参考基因组(EPI_ISL_402119, GISAID)相比,同源性大于99.9%。

 

间接免疫荧光法可以成功的发现分离出来的新冠肺炎病毒,其必要设备之一为生物荧光显微镜。事实上,荧光显微镜早就广泛用于呼吸道感染的快速临床检测,其中,广州明美推出的呼吸道感染检测专用LED荧光显微镜已服务于国内超过1000家的各级医院!

 

呼吸道感染是临床最常见的疾病之一,可由多种病原体引起,其中包括细菌、病毒、支原体、衣原体等。非典型呼吸道病原体因其临床的非特异性症状,大部分依靠实验室检查方法,且检测方法多种多样。免疫荧光技术(IF)又称免疫抗体技术,是一种以荧光素标记抗体(抗原)而进行抗原(抗体)定位的技术。该技术无放射性污染,且操作简便,特异性强、灵敏度高、检测速度快,成为临床检验中最常用的检验手段之一。

 

美国Diagnostic Hybrids, Inc公司的呼吸道七联检试剂盒和西班牙Vircell公司的九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒,是呼吸道感染检测中应用最为广泛的免疫荧光检测试剂产品。其中,美国七联检的检测项目包括A型(甲型)流感、B型(乙型)流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,共七种呼吸道疾病相关病毒;西班牙的呼吸道九联检的检测项目包括嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒1、2和3型,共九项呼吸道病毒。

在呼吸道疾病九联检和七联检试剂中应用最为广泛的荧光素为异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothinocyanate,FITC),其在蓝光的激发下呈现明亮的黄绿色荧光。针对呼吸道疾病免疫荧光检测用试剂的常用荧光素,M-shot推出了一整套的显微成像系统解决方案,该解决方案包括LED荧光显微镜和荧光专用数码摄像头。M-shot的LED荧光模块MF-LED除了搭配自主品牌的显微镜——如MF23、MF43、MF52外,可灵活地匹配各大品牌的显微镜。借助LED荧光模块,可轻松地将一台无限远光学系统的普通显微镜转化为节能高效的、易于操作和超长寿命的荧光显微镜。在呼吸道九联检的应用中,M-shot的显微成像方案具有卓越的表现,获得了美国七联检、西班牙九联检试剂使用者的一致好评。